實(shí)驗(yàn)選取10只清潔健康雄性成年(3~4月)SD大鼠為成年組,體質(zhì)量300~350 g;另選取20只清潔級(jí)健康雄性高齡(18~20月)SD大鼠,體質(zhì)量480~600 g,隨機(jī)分成2組,高齡組(n= 10 )和飽和氫氣鹽溶液組(H組,n = 10 )。將高壓氫氣(輸出壓力.4 M Pa)通入.9%氯化鈉6 h以達(dá)到飽和,滅菌 ,4攝氏度保存。成年組及高齡組 以 5 m L·kg~d-1 。生理鹽水灌胃,H 組以5 m L·kg~d-1 飽和氫氣鹽溶液灌胃,其他條件等同。8周后,收集所有大鼠腎臟組織 。
與成年組相比,高齡組SOD活力明顯降低,丙二醛和8-OHdG的含量明顯升高;與高齡組相比,H組SOD活力明顯升高,丙二醛和8-OHdG明顯降低。
正常細(xì)胞內(nèi)存在清除自由基的防御系統(tǒng) ,如SOD、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶、維生素E、醌類物質(zhì)等電子受體。它們的主要功能是及時(shí)清除機(jī)體生成的過量自由基,以防止其對(duì)組織細(xì)胞產(chǎn)生毒害作用。SOD是其中最重要的一種,可以使超氧陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng) ,從而消除其對(duì)機(jī)體的氧化損傷。而自由基誘導(dǎo)的DNA損傷主要是指DNA鏈上的鳥嘌呤堿基C一8位受到羥自由基及單線態(tài)氧的攻擊而發(fā)生羥化 ,生成加合物8-OHdG,使DNA受損,復(fù)制代謝能力降低 ,最終導(dǎo)致衰老。
SIRT1基因在能量限制(caloric restriction,CR )中發(fā)揮抗衰老作用,故被認(rèn)為是長壽基因。SIRT1通過參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、代謝、凋亡和衰老。增強(qiáng)細(xì)胞的氧化應(yīng)激和抗凋亡能力,參與細(xì)胞壽命的延長。抑制凋亡的進(jìn)行,進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞的生存,延長其壽命。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與成年組相比,高齡組腎臟SIRT1的表達(dá)顯著降低 ;而H組SIRT1的表達(dá)較高齡組增高了5倍多,說明隨著年齡的增加,SIRT1的表達(dá)伴隨衰老的進(jìn)行呈現(xiàn)出下降趨勢(shì),而飽和氫氣鹽溶液可上調(diào)SIRT1的表達(dá),起到一定的抗衰老作用。
綜上所述,本研究表明,隨著年齡的增長,腎臟出現(xiàn)衰老的表現(xiàn) ,如SOD活性降低,丙二醛、8-OHdG量升高 ,對(duì)抗自由基能力下降,脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物增加,細(xì)胞DNA受到損傷,而飽和氫氣鹽溶液能夠顯著改善上述情況,其抗衰老作用可能與影響p53,p16,SIRT1的表達(dá)有關(guān)。